Wat zijn plasmiden?

Binnen verschillende bacteriën, kunnen kleine ronde stukjes DNA in het cytoplasma. Deze DNA kringen bekend als plasmiden, en zijn gescheiden van het chromosomale DNA, of het DNA dat de genen voor de bacteriecellen draagt. Verschillende kopieën van de plasmiden zijn vaak aanwezig op een bepaald moment in de bacteriële cel. Plasmiden spelen een belangrijke rol bij genetische manipulatie, in het bijzonder in genklonering.

Als genen worden gekloneerd, het proces vindt gewoonlijk plaats in bacteriën. Om het gen dat moet worden gekloneerd in de bacteriën, een vector nodig. Een plasmide is wat wordt gebruikt als de vector, omdat het gemakkelijk van de ene cel naar de andere.

Er zijn een aantal stappen van genklonering voordat u een plasmide in een gastheercel. Ten eerste moet het gen dat moet worden gekopieerd worden geïsoleerd, evenals de plasmiden die worden gebruikt als vectoren. Zodra dit gebeurt, moet het gen worden geïnsereerd in het plasmide DNA. Het plasmide wordt vervolgens in de bacteriële gastheercel voor replicatie.

Om plasmiden uit bacteriële cellen te isoleren, moet de cellen eerst worden behandeld met enzymen breken de celwanden van de bacteriën. De grotere chromosomale DNA wordt het gescheiden van de kleinere plasmiden met een centrifuge. Het geïsoleerde plasmide-DNA is nu klaar om het gen ingevoegd in het.

Plasmiden bestaan ​​van een dubbelstrengs DNA cirkel. Om het gewenste gen in te voegen, wordt het plasmide DNA geknipt met restrictie-enzymen. Deze enzymen alleen knippen DNA bij specifieke nucleotidesequenties. Nadat de plasmide DNA is geknipt, worden linkersequenties toegevoegd aan de losse uiteinden die correleren met de uiteinden van het gen te voegen. Dit garandeert dat het gen past precies in het plasmide.

Nadat het gen in het plasmide ingebracht is nu klaar om in een levende bacterie te voegen. Bacteriën repliceren plasmiden zodat een enkele cel vele exemplaren kunnen bevatten. Er kunnen maximaal 200 exemplaren van één plasmide binnen een bacterie zijn. Wanneer het plasmide wordt ingebracht in vele bacteriële cellen, veel kopieën van het gen relatief snel worden geproduceerd, vooral bacteriën cellen repliceren ongeveer elke 20 minuten.

Dit is het proces dat wordt gebruikt om humane insuline maken. Het gen dat codeert voor insuline werd geïsoleerd en ingevoegd in een plasmide. Alle plasmiden die het insuline-gen werd vervolgens geïntroduceerd in een bacterie, waar ze werden gerepliceerd. De bacteriën bleven daarna zichzelf te vermenigvuldigen, waardoor vele miljoenen cellen die het insuline-gen kunnen worden gemaakt in een zeer korte tijd. Deze gekloneerde gen verschaft nu een betrouwbare bron voor humane insuline.

  • Alle plasmiden die het insuline-gen werd ingebracht in een bacterie, waar ze werden gerepliceerd.
  • Plasmiden het vermogen tot replicatie onafhankelijk is van chromosomale DNA van een persoon.

© 2020 Quilcedacarvers.com | Contact us: webmaster# quilcedacarvers.com